2026年4月22日，中国科学院上海药物研究所柳红课题组、生命过程小分子调控全国重点实验室李佳课题组在国际学术期刊Advanced Science上发表了题为“Discovery of a Potent Fluorescence Polarization Probe for Identifying USP1 Allosteric Inhibitors”的研究论文。该团队成功开发了靶向USP1变构位点的新型荧光探针及相应的荧光偏振分析方法，并报道了一类对弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞系具有强效抗增殖活性的特异性USP1抑制剂。

泛素特异性蛋白酶1（Ubiquitin-specific protease 1, USP1）是DNA修复中关键的去泛素化酶，其在多种肿瘤中表达失调，近年来已成为重要的抗肿瘤靶点，目前已有多款USP1变构抑制剂进入临床研究。经典的“泛素-罗丹明-110”筛选方法难以区分变构抑制剂与催化位点抑制剂，限制了靶向USP1变构抑制剂的发现与优化进程。

本项研究中，研究团队基于已报道的USP1变构抑制剂ML323和KSQ-4279的结合模式，设计了新型的四氢异喹啉骨架USP1荧光探针，探针6-2表现出良好的USP1结合亲和力且荧光性能优良。利用探针6-2建立了荧光偏振筛选体系，该体系能成功识别KSQ-4279，而非变构抑制剂均无法有效竞争探针6-2与USP1的结合，体现了该筛选方法在鉴定USP1变构抑制剂的准确性。

另一方面，本工作发现的新型四氢异喹啉衍生物14a表现出优秀的USP1抑制活性和对DUB家族去泛素化酶的选择性。在USP1高表达的MDA-MB-436及CAOV-3细胞中，14a与奥拉帕利联用呈现协同抗增殖效应。进一步的抗肿瘤谱筛选表明，14a对DLBCL细胞系OCI-LY10及TMD-8表现出强效抗增殖活性，IC₅₀值分别为240.93 nM和29.9 nM。机制研究表明，14a可剂量依赖性诱导OCI-LY10细胞凋亡、引起S期阻滞、下调促癌蛋白MYC的表达并促使Ub-PCNA累积。在OCI-LY10异种移植瘤模型中，14a可有效抑制肿瘤生长，未观察到明显毒性。综上，本研究为靶向USP1的药物发现提供了实用的荧光探针、荧光偏振检测平台以及先导化合物。

上海药物所柳红研究员、李佳研究员、李淳朴研究员、周宇波研究员为本论文共同通讯作者，沈阳药科大学联合培养博士生程嘉玮、南京中医药大学联合培养博士生王培培、国科大杭高院硕士生汪鹏飞为本论文共同第一作者。该项研究获得了国家重点研发计划、国家自然科学基金、上海药物所自主部署项目、中国科学院先导专项等项目的资助。

全文链接：https://doi.org/10.1002/advs.75350

靶向USP1变构位点的荧光探针及先导化合物发现

（供稿部门：柳红课题组、李佳课题组；审稿：刁文桐；责编：宋文珂）